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      食品中胡椒堿的高效液相色譜儀(HPLC)檢測方案 

      胡椒堿piperine)是一種生物堿,分子式C17H19NO3。存在于多種胡椒屬植物果實中,為其辛辣味成分之一,但胡椒的辛辣味主要來自它的異構體佳味堿。在商品黑胡椒和白胡椒中,胡椒堿的含量為5%~9%,有時高達11%。無色單斜棱柱狀晶體。熔點130133℃。溶于乙酸、苯、乙醇 和氯仿,微溶于乙醚。

      胡椒堿是一種廣譜抗驚厥藥,對小鼠實驗性電驚厥有良好的對抗作用,對戊四氮、印防己毒素、士的寧,以及腦室內注射筒箭毒堿、谷氨酸等引起的驚厥發作和聽源性發作,都有不同程度的對抗作用。胡椒堿對蠅類的毒性比除蟲菊高。

      賽智科技利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀,經實踐檢測可提供食品中胡椒堿的HPLC檢測方案,得出的結果準確可靠,檢出限好,適用于胡椒及胡椒制品的測定,僅供廣大用戶參考。

      以下是食品中胡椒堿測定的詳細檢測方法。

      1  儀器與試劑

      1.1 儀器
        LC-10Tvp高效液相色譜儀;
        Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm;
        組織搗碎機;
        樣品篩;
        萬分之一天平;
        棕色圓底燒瓶,配套冷凝回流裝置。

      1.2 試劑
        甲醇:色譜純。
        乙醇:95%(質量分數)。
        胡椒堿標準物質:純度大于98%。
        胡椒堿標準溶液:準確稱取10.0(精確到0.1)mg胡椒堿標準物質于10mL棕色燒杯中,用乙醇溶解,轉移至10mL棕色容量瓶中,用乙醇定容至刻度。

      2  測定原理
        試樣中的胡椒堿用乙醇提取,用高效液相色譜紫外檢測器檢測,外標法定量。

      3  色譜條件
        色譜柱:Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm;          
        流動相:甲醇+(77+23);
        流速:1 mL/min;
        進樣量:20μL。
        檢測波長:343nm

      4  試樣溶液的制備
        用組織搗碎機將胡椒打碎,然后用樣品篩將打碎的樣品篩過。稱取過篩的試樣0.2-0.5克,置于圓燒瓶中,加入50ml乙醇,裝上回流冷凝管,加熱至沸,保持回流3小時,冷卻至室溫后,將溶液慮入棕色容量瓶中,用乙醇少量多次沖洗抽提瓶和過濾器,洗液一并慮入容量瓶中,并加乙醇至刻度,搖勻,經0.45μm微孔濾膜過濾后,待液相色譜測定。

      從胡椒油樹脂試樣中稱取0,05-0.1克試料,置于100ml棕色容量瓶中,用乙醇定容至刻度,搖勻,經0.45μm微孔濾膜過濾后,待液相色譜測定。

      5  結果分析
        在添加0.25g/kg-5.0g/kg范圍內,回收率在89%-106之間,相對標準偏差小于5%。
        色譜圖如下圖所示,其峰型較好,滿足日常檢測要求。 

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      胡椒堿標準色譜圖


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