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      油脂類產品中抗氧化劑的高效液相色譜儀(HPLC)檢測方案

      食品在儲存、加工和流通過程中,食品中的油脂類組分易因氧化作用引起變色或變味并會生成有害物質,特別是油脂和富脂食品常因氧化而酸敗。添加抗氧化劑可防止食品成分氧化變質。近半個世紀以來,在油脂和富脂食品中加入抗氧化劑以抑制或延緩食品在加工或流通儲存過程中氧化變質已成為食品加工中的常規手段。

      飲食中抗氧化劑長期以來倍受國內外學者關注,這是因為:1.食物中抗氧化劑能夠保護食物免受氧化損傷而變質。2.在人體消化道內具有抗氧化作用,防止消化道發生氧化損傷。3.吸收后可在機體其他組織器官內發揮作用。4.來源于食物的某些具有抗氧化作用的提取物可以作為治療藥品??寡趸瘎┑淖饔脵C理包括鰲合金屬離子、清除自由基、淬滅單線態氧、清除氧、抑制氧化酶活性等。

      抗氧化劑作為食品添加劑的一種,有添加的量上有明確的要求。賽智科技利用全新高性能的LC-10Tvp高效液相色譜儀,經實踐檢測可提供油脂中抗氧化劑的HPLC檢測方案,得出的結果準確可靠,檢出限好,適用于油脂類產品的測定,僅供廣大用戶參考。

      以下是油脂類產品中抗氧化劑的測定的詳細檢測方法。

      1  儀器與試劑

      1.1 儀器
        LC-10Tvp高效液相色譜儀(雙泵梯度系統,帶反控軟件VI2010);
        Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm;
        液體混勻器;
        旋轉蒸發儀;具塞離心管;
        比色管;
        萬分之一天平;
        0.45μm微孔濾膜。

      1.2 試劑
        正己烷:分析純,重蒸。
        乙腈:色譜純。
        異丙醇:分析純,重蒸。
        甲醇:色譜純。
        乙酸:分析純。
        乙腈飽和正己烷:正己烷中加入乙腈飽和。
        正己烷飽和乙腈:乙腈中加入正己烷飽和。
        抗氧化劑標準品:沒食子酸丙酯(PG)、2,4,5-三羥基苯丁酮(THBP)、叔丁基對苯二酚(TBHQ)、去甲二氫愈創木酸(NDGA)、叔丁基對羥基茴香醚(BHA)、2,6-二叔丁基-4-羥甲基苯酚(Ionox-100)、沒食子酸辛酯(OG)、2,6-二叔丁基對甲基苯酚(BHT)、沒食子酸十二酯(DG)。
        抗氧化劑標準工作液:用甲醇-異丙醇(1+1,v/v)配成合適的濃度。

      2  測定原理
        油脂樣品用正己烷溶解,用乙腈提取其中的抗氧化劑,提取液經濃縮后,用異丙醇定容,用高效液相色譜紫外檢測器檢測,外標法定量。

      3  色譜條件
        色譜柱:Vertex 色譜柱 250mm×4.6mm×5μm;          
        流動相:1.5%乙酸-甲醇(A,1.5%乙酸-水溶液(B)。梯度洗脫0min-5min,   A30%;5min-20min,A30%增至80;20min-30min,A80%。
        流速:1 mL/min。
        進樣量:20μL。
        檢測波長:280nm

      4  試樣溶液的制備
        稱取油脂1g(精確至0.01g)于離心管中,加入5mL乙腈飽和的正己烷,在液體混勻器上快速混勻以充分溶解油樣,加入10mL正己烷飽和的乙腈,一液體混勻器上快速1min,靜置分層,用膠頭滴管將乙腈層轉入比色管中。如上操作提取兩次,合并乙腈于比色管內。乙腈在40度下用旋轉蒸發儀濃縮至近干,用異丙醇定容至2mL,經0.45μm微孔濾膜過濾,上機分析。

      5  結果分析
        在添加2mg/kg-200mg/kg范圍內,回收率在82.5%-98.7之間,相對標準偏差小于5%。色譜圖如下圖所示,其峰型較好,滿足日常檢測要求。

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